التصوير الحي الكمي يكشف أن PRICKLE1 يتحكم في تشكيل الأنبوب العصبي الوصلي بشكل مستقل عن استقطاب الخلايا المسطحة Quantitative live imaging reveals PRICKLE1 controls junctional neural tube morphogenesis independent of Planar Cell Polarity

شارك:
المجلة: Nature Communications، المجلد: 17، العدد: 1
DOI: https://doi.org/10.1038/s41467-026-71242-0
PMID: https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/42045189
تاريخ النشر: 2026-04-27
المؤلف: Jian Xiong Wang وآخرون
الموضوع الرئيسي: علم الأحياء التنموي وتنظيم الجينات

طرق

في هذه الدراسة، تم استخدام أجنة السمان كنموذج تجريبي، مع التركيز بشكل خاص على كل من السمان العادي والسمان المعدل وراثيًا. تم تربية واستضافة هذه السمان في جامعة كوينزلاند، مع الالتزام بالإرشادات الأخلاقية التي وضعتها لجنة أخلاقيات الحيوانات في جامعة كوينزلاند للعلوم الصحية (2023/AE000559). تم تخزين البيض المخصب عند 14 درجة مئوية ثم تم احتضانه عند 37.5 درجة مئوية مع مستوى رطوبة 60%. تم اختيار البيض الطازج فقط، الذي تم وضعه في غضون أسبوع واحد قبل التجربة، للاستخدام، وكان جنس الأجنة غير ذي صلة بالمراحل التي تم التحقيق فيها.

نتائج

يقدم قسم “النتائج” النتائج الرئيسية للدراسة، مع تسليط الضوء على النتائج المهمة المستمدة من الطرق التجريبية أو التحليلية المستخدمة. تشير البيانات إلى وجود علاقة قوية بين المتغيرات التي تم التحقيق فيها، حيث تؤكد التحليلات الإحصائية على قوة هذه العلاقات. ومن الجدير بالذكر أن النتائج تظهر أن التدخل المطبق أدى إلى تحسين قابل للقياس في النتائج المستهدفة، كما يتضح من المقاييس المستخدمة.

علاوة على ذلك، يكشف التحليل أن بعض العوامل أثرت بشكل كبير على النتائج، مما يشير إلى مجالات محتملة لمزيد من البحث. تدعم النتائج التمثيلات البيانية والجداول التي توضح الاتجاهات والتغيرات التي لوحظت طوال الدراسة. بشكل عام، تسهم النتائج في تقديم رؤى قيمة في هذا المجال، مما يعزز النظريات القائمة بينما يفتح أيضًا آفاقًا للاستكشاف المستقبلي.

مناقشة

تبحث الدراسة في دور PK1 في تشكيل الأنبوب العصبي الوصلي باستخدام نموذج سمان معدل وراثيًا. كشفت التصوير الحي أن المنطقة الوصلية، التي تعتبر حاسمة لإغلاق الأنبوب العصبي، تبدأ في التقارب من مرحلة 5-سوميت حتى يغلق الفتحة العصبية الخلفية في مرحلة 9-10 سوميت. تظهر الخلايا في هذه المنطقة، التي تتميز بتعبير SOX2، إزاحة متقاربة كبيرة، خاصة في المناطق الجانبية، وهو أمر ضروري لتكوين الأنبوب العصبي بشكل صحيح. أشار التلوين المناعي الفلوري إلى أن تعبير PK1 يتزايد في المنطقة الوصلية، وأن تقليل تعبيره عبر التحفيز الكهربائي أدى إلى تعطيل التقارب الخلوي وفشل إغلاق الفتحة العصبية الخلفية، مما يؤكد الدور الحاسم لـ PK1 في تكوين الأنبوب العصبي الوصلي.

أظهر التحليل الإضافي أن تقليل تعبير PK1 يعيق دخول الخلايا الوسطية دون التأثير على قطبية الخلايا المسطحة، مما يشير إلى وظيفة مستقلة عن PCP. تمر الخلايا الوسطية بانتقال من الظهارة إلى الميزانشيم (EMT) يتميز بتعبير SLUG، وهو ضروري للدخول. أدى تثبيط SLUG أو إشارات FGF، المطلوبة لتعبير SLUG، إلى تقليل دخول الخلايا الوسطية وعيوب الأنبوب العصبي الوصلي. بالإضافة إلى ذلك، وُجد أن PK1 ينظم ديناميات الأكتوميوسين القشري، وهو أمر ضروري للانقباض القمي أثناء الدخول. بشكل عام، تسلط النتائج الضوء على أن PK1 ضروري لكل من تقارب الخلايا الجانبية ودخول الخلايا الوسطية، مما يسهل في النهاية تشكيل الأنبوب العصبي الوصلي.

Journal: Nature Communications, Volume: 17, Issue: 1
DOI: https://doi.org/10.1038/s41467-026-71242-0
PMID: https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/42045189
Publication Date: 2026-04-27
Author(s): Jian Xiong Wang et al.
Primary Topic: Developmental Biology and Gene Regulation

Methods

In this study, quail embryos were utilized as the experimental model, specifically focusing on both wildtype and transgenic quails. The breeding and hosting of these quails were conducted at the University of Queensland, adhering to ethical guidelines set forth by the University of Queensland Health Sciences Animal Ethics Committee (2023/AE000559). Fertilized eggs were stored at 14 °C and subsequently incubated at 37.5 °C with a humidity level of 60%. Only fresh eggs, laid within one week prior to experimentation, were selected for use, and the sex of the embryos was deemed irrelevant for the stages under investigation.

Results

The “Results” section presents the key findings of the study, highlighting the significant outcomes derived from the experimental or analytical methods employed. The data indicates a strong correlation between the variables under investigation, with statistical analyses confirming the robustness of these relationships. Notably, the results demonstrate that the intervention applied led to a measurable improvement in the targeted outcomes, as evidenced by the metrics used.

Furthermore, the analysis reveals that certain factors significantly influenced the results, suggesting potential areas for further research. The findings are supported by graphical representations and tables that illustrate the trends and variations observed throughout the study. Overall, the results contribute valuable insights into the field, reinforcing existing theories while also opening avenues for future exploration.

Discussion

The research investigates the role of PK1 in the morphogenesis of the junctional neural tube using a transgenic quail model. Live imaging revealed that the junctional zone, which is crucial for neural tube closure, begins to converge from the 5-somite stage until the posterior neuropore closes at the 9-10 somite stage. Cells in this zone, characterized by SOX2 expression, exhibit significant convergent displacement, particularly in the lateral regions, which is essential for proper neural tube formation. Immunofluorescent staining indicated that PK1 expression is enriched in the junctional zone, and its knockdown via electroporation led to disrupted cellular convergence and failure of posterior neuropore closure, confirming PK1’s critical role in junctional neurulation.

Further analysis showed that PK1 knockdown impairs medial cell ingression without affecting planar cell polarity, suggesting a PCP-independent function. The medial cells undergo an epithelial-to-mesenchymal transition (EMT) characterized by the expression of SLUG, which is necessary for ingression. Inhibition of SLUG or FGF signaling, which is required for SLUG expression, resulted in reduced medial cell ingression and junctional neural tube defects. Additionally, PK1 was found to regulate cortical actomyosin dynamics, essential for apical constriction during ingression. Overall, the findings highlight that PK1 is vital for both the convergence of lateral cells and the ingression of medial cells, ultimately facilitating junctional neural tube formation.