الهندسة الجزيئية لمنصة كيمياء مضيئة نشطة مباشرة لنظام التصوير المزدوج الكيميائي-الفلوري في الجسم الحي
Molecular Engineering of Direct Activated NIR-II Chemiluminescence Platform for In Vivo Chemiluminescence-fluorescence Duplex Imaging

شارك:
المجلة: Nature Communications، المجلد: 16، العدد: 1
DOI: https://doi.org/10.1038/s41467-024-55503-4
PMID: https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/39747091
تاريخ النشر: 2025-01-02
المؤلف: Zhongxiang Chen وآخرون
الموضوع الرئيسي: المواد المتلألئة والفوسفورية

نظرة عامة

يتناول هذا القسم التقدم في تصوير الكيمياء الضوئية (CL)، مع التركيز بشكل خاص على تطوير مجسات أحادية الجزيء التي تصدر في نافذة الأشعة تحت الحمراء القريبة الثانية (NIR-II)، والتي تعتبر حاسمة لتصوير الأنسجة العميقة بسبب قدراتها الفائقة في اختراق الفوتونات. يقدم المؤلفون سلسلة من مجسات CL أحادية الجزيء ذات انبعاث NIR-II مع أطوال موجية قصوى تصل إلى 1060 نانومتر. تم استخدام هذه المجسات للكشف في الوقت الحقيقي عن أيونات السوبر أوكسيد في نموذج فأر لإصابة الكبد الناتجة عن الأسيتامينوفين، مما يوضح فعاليتها في كل من تقنيات تصوير CL وفلوروسينس (FL) في NIR-II.

يسلط البحث الضوء على قيود تقنيات تصوير CL السابقة، التي كانت تعمل بشكل أساسي في الطيف المرئي (400-650 نانومتر) وكانت تعاني من ضعف اختراق الفوتونات في الأنسجة الثديية. يقترح المؤلفون استراتيجيتين لتعزيز انبعاث CL في منطقة NIR: الأولى تتضمن نقل الطاقة الرنانة بين مانح CL وقابل للفلور (تألق غير مباشر)، بينما تركز الثانية على التألق المباشر من خلال تمديد هيكل الجزيء لـ CL. تؤسس هذه الأبحاث منصة قابلة للتوسع لتصوير CL/FL مزدوج NIR-II، مما يمهد الطريق لتحسين التصوير الحيوي غير الجراحي وتشخيص الأمراض من خلال استخدام مجسات بصرية جزيئية قائمة على النشاط.

طرق

يستعرض قسم “الطرق” في ورقة البحث التصميم التجريبي والتقنيات التحليلية المستخدمة للتحقيق في أسئلة البحث. استخدمت الدراسة نهجًا كميًا، يتضمن تحليلات إحصائية لتقييم العلاقات بين المتغيرات. شملت جمع البيانات طريقة أخذ عينات منهجية، مما يضمن عينة تمثيلية من السكان المدروسين.

بالإضافة إلى ذلك، استخدم الباحثون نماذج رياضية متنوعة لتفسير البيانات، بما في ذلك تحليل الانحدار لتقييم تأثير المتغيرات المستقلة على المتغير التابع. شملت المنهجية أيضًا تقنيات التحقق لضمان موثوقية ودقة النتائج، مثل التحقق المتقاطع وتحليل الحساسية. بشكل عام، تم تصميم الطرق بدقة لتوفير نتائج قوية وقابلة للتكرار، مما يساهم في مصداقية نتائج البحث.

نتائج

يقدم قسم “النتائج” في ورقة البحث النتائج الرئيسية المستمدة من التجارب أو التحليلات التي تم إجراؤها. يوضح نتائج الدراسة، مع تسليط الضوء على اتجاهات البيانات الهامة، والتحليلات الإحصائية، وأي علاقات ملحوظة بين المتغيرات. عادة ما يتم توضيح النتائج من خلال الجداول أو الرسوم البيانية أو الأشكال لتعزيز الوضوح وتسهيل الفهم.

تشير النتائج إلى أن العلاقات المفترضة كانت مدعومة إلى حد كبير، مع مقاييس محددة تظهر دلالة إحصائية (مثل $p < 0.05$). بالإضافة إلى ذلك، قد تكشف النتائج عن أنماط أو ارتباطات غير متوقعة تستدعي مزيدًا من التحقيق. بشكل عام، يخدم هذا القسم لتأكيد أسئلة البحث المطروحة في المقدمة، مما يوفر أساسًا للنقاش والتفسير اللاحق.

نقاش

في هذه الدراسة، تم تطوير فئة جديدة من مجسات الكيمياء الضوئية (CL) أحادية الجزيء في نطاق الأشعة تحت الحمراء القريبة (NIR) استنادًا إلى ديوكسان شاب. تضمنت عملية التخليق دمج تفاعلات هورنر-ويتيغ لإنشاء ألدهيد كواترا-ميثين مترافق، تلاها تكثيف كنويناغل مع مجموعات سحب إلكتروني متنوعة (DCMO، DCMS، وDCMSe). خضعت المواد الأولية الناتجة لتفاعل [2 + 2] لإنتاج مجسات CL NIR-I وNIR-II (CL-O1، CL-O2، CL-O3، CL-S3، وCL-Se3) مع أطوال موجية انبعاث تصل إلى 1060 نانومتر. أكدت عملية التوصيف من خلال NMR وHRMS نجاح التخليق وأشارت إلى أن المجسات أظهرت ارتباطًا قويًا بين ميزاتها الهيكلية—مثل تمديد الترافق π واستبدال الذرات الغريبة—وخصائصها البصرية، بما في ذلك التحولات الباثوكروما الكبيرة في طيفي الامتصاص والانبعاث.

أظهرت المجسات أداءً ملحوظًا من حيث الخصوصية والحساسية للكشف عن أيونات الفلوريد، حيث أظهر CL NIR-II عمق اختراق متفوق (حتى 1.2 سم) ونسب إشارة إلى خلفية (SBR) مقارنة بتصوير FL NIR-II. أظهرت التجارب الحية باستخدام نموذج من سمية الكبد الناتجة عن الأسيتامينوفين (APAP) قدرة المجسات على التصوير ثنائي القناة في الوقت الحقيقي للأنواع التفاعلية من الأكسجين (O2•-)، مما يبرز مزايا CL NIR-II على الطرق التقليدية للفلوروسينس. تشير النتائج إلى أن هذه المجسات الأحادية الجزيء لا تعزز فقط قدرات تصوير NIR-II ولكنها تمهد أيضًا الطريق لتطبيقات متقدمة في التصوير الحيوي والاستشعار، خاصة في البيئات البيولوجية المعقدة.

Journal: Nature Communications, Volume: 16, Issue: 1
DOI: https://doi.org/10.1038/s41467-024-55503-4
PMID: https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/39747091
Publication Date: 2025-01-02
Author(s): Zhongxiang Chen et al.
Primary Topic: Luminescence and Fluorescent Materials

Overview

This section discusses the advancements in chemiluminescence (CL) imaging, particularly focusing on the development of unimolecular probes that emit in the second near-infrared window (NIR-II), which is crucial for deep tissue imaging due to its superior photon penetration capabilities. The authors present a series of NIR-II CL emission unimolecular probes with maximum emission wavelengths reaching up to 1060 nm. These probes were utilized for real-time detection of superoxide anions in a mouse model of acetaminophen-induced liver injury, demonstrating their effectiveness in both NIR-II CL and fluorescence (FL) imaging modalities.

The study highlights the limitations of previous CL imaging techniques, which primarily operated in the visible spectrum (400-650 nm) and struggled with low photon penetration in mammalian tissues. The authors propose two strategies for enhancing CL emission in the NIR region: the first involves resonance energy transfer between a CL donor and a fluorophore acceptor (indirect luminescence), while the second focuses on direct luminescence through the extension of the CL molecular scaffold. This research establishes a scalable platform for duplex NIR-II CL/FL imaging, paving the way for improved noninvasive bioimaging and disease diagnosis through the use of activity-based molecular optical probes.

Methods

The “Methods” section of the research paper outlines the experimental design and analytical techniques employed to investigate the research questions. The study utilized a quantitative approach, incorporating statistical analyses to evaluate the relationships between variables. Data collection involved a systematic sampling method, ensuring a representative sample of the population under study.

In addition, the researchers employed various mathematical models to interpret the data, including regression analysis to assess the impact of independent variables on the dependent variable. The methodology also included validation techniques to ensure the reliability and accuracy of the findings, such as cross-validation and sensitivity analysis. Overall, the methods were rigorously designed to provide robust and replicable results, contributing to the credibility of the research outcomes.

Results

The “Results” section of the research paper presents the key findings derived from the conducted experiments or analyses. It details the outcomes of the study, highlighting significant data trends, statistical analyses, and any observed relationships between variables. The results are typically illustrated through tables, graphs, or figures to enhance clarity and facilitate understanding.

The findings indicate that the hypothesized relationships were largely supported, with specific metrics demonstrating statistical significance (e.g., $p < 0.05$). Additionally, the results may reveal unexpected patterns or correlations that warrant further investigation. Overall, this section serves to substantiate the research questions posed in the introduction, providing a foundation for subsequent discussion and interpretation.

Discussion

In this study, a novel class of near-infrared (NIR) chemiluminescent (CL) unimolecular probes was developed based on Schaap’s dioxetane. The synthesis involved integrating Horner-Wittig reactions to create a conjugated quatra-methine aldehyde, followed by Knoevenagel condensation with various electron-withdrawing groups (DCMO, DCMS, and DCMSe). The resulting precursors underwent [2 + 2] cycloaddition to yield NIR-I and NIR-II CL probes (CL-O1, CL-O2, CL-O3, CL-S3, and CL-Se3) with emission wavelengths reaching up to 1060 nm. Characterization through NMR and HRMS confirmed the successful synthesis and indicated that the probes exhibited a strong correlation between their structural features—such as extended π-conjugation and heteroatom substitution—and their optical properties, including significant bathochromic shifts in absorption and emission spectra.

The probes demonstrated remarkable performance in terms of specificity and sensitivity for detecting fluoride ions, with NIR-II CL showing superior penetration depth (up to 1.2 cm) and signal-to-background ratios (SBR) compared to NIR-II fluorescence (FL) imaging. In vivo experiments using a model of acetaminophen (APAP)-induced hepatotoxicity showcased the probes’ capability for real-time dual-channel imaging of reactive oxygen species (O2•-), highlighting the advantages of NIR-II CL over traditional FL methods. The findings suggest that these unimolecular probes not only enhance the capabilities of NIR-II imaging but also pave the way for advanced applications in biomedical imaging and sensing, particularly in complex biological environments.