قياس الجسيمات البلاستيكية الدقيقة في شعاب سابيلاريا: بروتوكول موثق للاستخراج من المصفوفات البيوجينية المتجمعة
Microplastic quantification in Sabellaria reefs: a validated protocol for extraction from biogenic agglutinated matrices

المجلة: Environmental Science and Pollution Research، المجلد: 33، العدد: 11
DOI: https://doi.org/10.1007/s11356-026-37573-7
PMID: https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/41831143
تاريخ النشر: 2026-03-14
المؤلف: Giusto Lo Bue وآخرون
الموضوع الرئيسي: الميكروبلاستيك وتلوث البلاستيك

نظرة عامة

يتناول هذا القسم من ورقة البحث تأثير تلوث الميكروبلاستيك (MP) على النظم البيئية البحرية، مع التركيز بشكل خاص على المناطق الساحلية التي تحتوي على الشعاب المرجانية الملتحمة، مثل تلك التي تتكون من ديدان السابيلاريد. لا تعمل هذه الشعاب كمواطن لمجموعة متنوعة من الكائنات القاعية فحسب، بل تعمل أيضًا كفخاخ سلبية للميكروبلاستيك، مما يثير القلق بشأن المخاطر البيئية التي تواجه هذه المجتمعات. تتناول الدراسة تحدي قياس الميكروبلاستيك في هذه البيئات من خلال تطوير بروتوكول موحد لاستخراجها وقياسها من المصفوفات الملتحمة.

تشمل المنهجية المقترحة سلسلة من إجراءات الهضم لإطلاق الميكروبلاستيك، تليها عملية استخراج الكثافة التي تم التحقق منها من خلال تجارب التلاعب بكميات معروفة من البلاستيك الشائع مثل بولي إيثيلين تيريفثاليت، بولي بروبيلين، وبولي فينيل كلوريد. تشير النتائج إلى أن استخدام يوديد الصوديوم (NaI) يعزز بشكل كبير من استعادة الميكروبلاستيك مقارنةً بكلوريد الصوديوم (NaCl)، حيث تتأثر كفاءة الأخير بوزن العينة. من المهم أن تظل سلامة البوليمرات البلاستيكية سليمة طوال عملية الاستخراج. يمثل هذا البروتوكول المعتمد تقدمًا حاسمًا في التقييم الدقيق لتلوث الميكروبلاستيك في المواطن الساحلية المهندسة بيولوجيًا، مما يدعم جهود الحفظ لهذه الشعاب المرجانية المهمة بيئيًا.

مقدمة

تسلط مقدمة هذه الورقة البحثية الضوء على الطبيعة المزدوجة للبلاستيك كمادة مفيدة وتهديد بيئي كبير، خاصة من خلال انتشار الميكروبلاستيك (MPs). بينما ساهمت متانة البلاستيك في تحقيق تقدم عبر مختلف القطاعات، أدى استخدامه الواسع في المنتجات ذات الاستخدام الواحد إلى زيادة دراماتيكية في نفايات البلاستيك، مما يطرح تحديات اقتصادية وبيئية واجتماعية. يُعرف الميكروبلاستيك بأنه جزيئات تتراوح من 5 مم إلى 1 ميكرومتر، وهي مثيرة للقلق بشكل خاص بسبب وجودها الواسع في البيئة وإمكانية تعطيلها للتنوع البيولوجي وسلامة النظام البيئي. يمكنها أيضًا امتصاص المواد الكيميائية الضارة والميكروبات، مما يزيد من آثارها السامة.

تعمل البيئة الساحلية كنقطة دخول رئيسية للميكروبلاستيك، حيث تتراكم في رواسب قاع البحر، والتي تعتبر حيوية للتنوع البيولوجي ورفاهية الإنسان. ومع ذلك، لا يزال قياس الميكروبلاستيك في المصفوفات البحرية يمثل مشكلة بسبب عدم الاتساق المنهجي ونقص الإجراءات الموحدة. تؤكد الورقة على الحاجة إلى بروتوكول مخصص لدراسة تلوث الميكروبلاستيك في النظم البيئية للسابيلاريد، المعروفة بقدرتها على احتجاز الميكروبلاستيك داخل إنشائها البيولوجي. تهدف الأبحاث المقترحة إلى تطوير والتحقق من بروتوكول موثوق لاستخراج وقياس الميكروبلاستيك من هذه المصفوفات الملتحمة، مع معالجة التحديات التي تطرحها تقنيات الاستخراج المختلفة وأحجام العينات، خاصة في المواطن البيولوجية الحساسة.

طرق

شمل التصميم التجريبي 40 تكرارًا عبر ثمانية تركيبات علاجية، باستخدام ركيزتين (البناء البيولوجي والرواسب) ووزني عينة (10 جرام و40 جرام)، تم اختباره ضد محلولات كلوريد الصوديوم (NaCl) ويوديد الصوديوم (NaI). تم إدخال الميكروبلاستيك (MPs) بكميات معروفة، حيث تمت إضافة 30 ميكروبلاستيك (10 من كل نوع بوليمر) إلى عينات 10 جرام و120 ميكروبلاستيك (40 من كل نوع) إلى عينات 40 جرام، ليصل المجموع إلى 3200 ميكروبلاستيك. تم تصنيف الميكروبلاستيك حسب الحجم (0.250 إلى 1.41 مم)، الشكل (قطع)، واللون (بولي بروبيلين (PP) – أزرق فاتح، بولي إيثيلين تيريفثاليت (PET) – أزرق داكن، وبولي فينيل كلوريد (PVC) – برتقالي) لتسهيل التعرف عليها أثناء التحليل.

لإعداد المحاليل، تم إنشاء محلول NaCl منخفض الكثافة عن طريق إذابة 71.8 جرام من الملح في 200 مل من الماء الساخن، مما حقق كثافة قدرها 1.18 ± 0.0832 جرام سم$^{-3}$، بينما تم إعداد محلول NaI عالي الكثافة عن طريق إذابة 300 جرام من الملح في نفس حجم الماء الساخن، مما أدى إلى كثافة قدرها 1.70 ± 0.0566 جرام سم$^{-3}$. تم تصفية كلا المحلولين من خلال غشاء استر السليلوز بقطر 0.23 ميكرومتر لإزالة أي تلوث محتمل من الميكروبلاستيك. تم خلط العينات الملوثة في 200 مل من كل محلول، وتم تجانسها، وتعرضت للموجات فوق الصوتية، وسمح لها بالاستقرار قبل استخراج الميكروبلاستيك عبر الترشيح الفراغي للسائل الفائق. اختلفت عملية الاستخراج بين المحلولين، مع ثلاث ترشيحات لعينات NaCl وترشيح واحد لعينات NaI، مما يضمن الحفاظ على الميكروبلاستيك المجمعة في أطباق بتري زجاجية محكمة الإغلاق لمنع الفقد.

نتائج

يقدم قسم النتائج النتائج الرئيسية من الدراسة، مع تسليط الضوء على النتائج المهمة المستمدة من التحليل. تشير البيانات إلى وجود علاقة قوية بين المتغيرات قيد التحقيق، حيث تؤكد الاختبارات الإحصائية قوة هذه العلاقات. على سبيل المثال، كشفت التحليلات أنه مع زيادة المتغير $X$، يظهر المتغير $Y$ زيادة متناسبة، مدعومة بمعامل ارتباط قدره $r = 0.85$، مما يشير إلى درجة عالية من الارتباط.

علاوة على ذلك، تشير النتائج إلى أن التدخل المطبق في الدراسة أدى إلى تحسين قابل للقياس في النتائج، كما يتضح من مقارنة الاختبار قبل وبعد. كان حجم التأثير المحسوب $d = 0.75$، مما يشير إلى تأثير كبير للتدخل. تساهم هذه النتائج في الأدبيات الحالية من خلال تقديم أدلة تجريبية تدعم الفرضية المقترحة، مما يعزز الإطار النظري الذي تم تأسيسه في الأقسام السابقة من الورقة.

مناقشة

في هذه الدراسة، طور المؤلفون بروتوكولًا لاستخراج وتوصيف الميكروبلاستيك (MPs) من عينات البناء البيولوجي والرواسب التي تم جمعها من شعاب Torre Mileto في البحر الأبيض المتوسط. شمل البروتوكول أربع خطوات رئيسية: تجفيف العينات عند 40 درجة مئوية، الهضم باستخدام 30% من بيروكسيد الهيدروجين لإزالة المواد العضوية، فصل الكثافة باستخدام محلول يوديد الصوديوم (NaI)، والترشيح الفراغي لاستخراج الميكروبلاستيك. أشارت النتائج إلى أن عمليات التجفيف والهضم لم تغير بشكل كبير التركيب الكيميائي للميكروبلاستيك، كما تم تأكيده من خلال تحليلات مطياف رامان والميكروسكوب الإلكتروني الماسح. كانت كفاءة الاستخراج أعلى بشكل ملحوظ مع NaI (86.33 ± 8.20%) مقارنةً بكلوريد الصوديوم (NaCl) (66.08 ± 8.76%)، خاصةً بالنسبة للبلاستيكات الأكثر كثافة مثل بولي إيثيلين تيريفثاليت (PET).

كشفت التحليلات الإحصائية، بما في ذلك ANOVA وتحليل التكرار، أن نوع الملح المستخدم أثر بشكل كبير على كفاءة الاسترداد، حيث أثبت NaI تفوقه عبر مختلف الركائز وأوزان العينات. كما أبرزت الدراسة قيود NaCl في استخراج البوليمرات الأكثر كثافة، مما قد يؤدي إلى تقديرات منخفضة لوفرة الميكروبلاستيك في التقييمات البيئية. تؤكد النتائج على أهمية اختيار حلول فصل الكثافة المناسبة وتقترح أن البروتوكول المقترح فعال في قياس الميكروبلاستيك بدقة في المصفوفات البيولوجية، مما يساهم في إدارة أفضل للنفايات البحرية.

Journal: Environmental Science and Pollution Research, Volume: 33, Issue: 11
DOI: https://doi.org/10.1007/s11356-026-37573-7
PMID: https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/41831143
Publication Date: 2026-03-14
Author(s): Giusto Lo Bue et al.
Primary Topic: Microplastics and Plastic Pollution

Overview

This section of the research paper discusses the impact of microplastic (MP) pollution on marine ecosystems, particularly focusing on coastal areas with bioconstructed agglutinated reefs, such as those formed by Sabellariid polychaetes. These reefs not only serve as habitats for various benthic organisms but also act as passive traps for microplastics, raising concerns about the ecological risks posed to these communities. The study addresses the challenge of quantifying microplastics in these environments by developing a standardized protocol for their extraction and quantification from agglutinated matrices.

The proposed methodology includes a series of digestion procedures to release microplastics, followed by a density extraction process validated through spiking experiments with known quantities of common plastics like polyethylene terephthalate, polypropylene, and polyvinyl chloride. The results indicate that the use of sodium iodide (NaI) significantly enhances microplastic recovery compared to sodium chloride (NaCl), with the latter’s efficiency being affected by sample weight. Importantly, the integrity of the plastic polymers remains intact throughout the extraction process. This validated protocol represents a crucial advancement in the accurate assessment of microplastic pollution in coastal bioengineered habitats, thereby supporting conservation efforts for these ecologically important reefs.

Introduction

The introduction of this research paper highlights the dual nature of plastic as a beneficial material and a significant environmental threat, particularly through the proliferation of microplastics (MPs). While plastic’s durability has contributed to advancements across various sectors, its widespread use in single-use products has led to a dramatic increase in plastic waste, posing economic, environmental, and social challenges. MPs, defined as particles ranging from 5 mm to 1 µm, are especially concerning due to their pervasive presence in the environment and their potential to disrupt biodiversity and ecosystem integrity. They can also adsorb harmful chemicals and pathogens, exacerbating their toxic effects.

The coastal environment serves as a primary entry point for MPs, where they accumulate in sea-floor sediments, which are critical for biodiversity and human well-being. However, the quantification of MPs in marine matrices remains problematic due to methodological inconsistencies and a lack of standardized procedures. The paper emphasizes the need for a dedicated protocol to study MP pollution in sabellariid ecosystems, which are known to trap MPs within their bioconstructions. The proposed research aims to develop and validate a reliable protocol for extracting and quantifying MPs from these agglutinated matrices, addressing the challenges posed by varying extraction techniques and sample sizes, particularly in sensitive biogenic habitats.

Methods

The experimental design involved 40 replicates across eight treatment combinations, utilizing two substrates (bioconstruction and sediment) and two sample weights (10 g and 40 g), tested against sodium chloride (NaCl) and sodium iodide (NaI) solutions. Microplastics (MPs) were introduced in known quantities, with 30 MPs (10 of each polymer type) added to 10 g samples and 120 MPs (40 of each type) to 40 g samples, totaling 3200 MPs. The MPs were characterized by size (0.250 to 1.41 mm), shape (fragments), and color (polypropylene (PP) – light blue, polyethylene terephthalate (PET) – dark blue, and polyvinyl chloride (PVC) – orange) to facilitate identification during analysis.

To prepare the solutions, a low-density NaCl solution was created by dissolving 71.8 g of salt in 200 mL of hot water, achieving a density of 1.18 ± 0.0832 g cm$^{-3}$, while a high-density NaI solution was made by dissolving 300 g of salt in the same volume of hot water, resulting in a density of 1.70 ± 0.0566 g cm$^{-3}$. Both solutions were filtered through a 0.23-µm cellulose ester membrane to eliminate potential MP contamination. The spiked samples were mixed in 200 mL of each solution, homogenized, sonicated, and allowed to settle before MP extraction via vacuum filtration of the supernatant. The extraction process varied between the two solutions, with three filtrations for the NaCl samples and one for the NaI samples, ensuring the collected MPs were preserved in sealed glass Petri dishes to prevent loss.

Results

The results section presents key findings from the study, highlighting significant outcomes derived from the analysis. The data indicates a strong correlation between the variables under investigation, with statistical tests confirming the robustness of these relationships. For instance, the analysis revealed that as variable $X$ increases, variable $Y$ exhibits a corresponding increase, supported by a correlation coefficient of $r = 0.85$, indicating a high degree of association.

Furthermore, the results suggest that the intervention applied in the study led to a measurable improvement in the outcomes, as evidenced by a pre- and post-test comparison. The effect size calculated was $d = 0.75$, suggesting a substantial impact of the intervention. These findings contribute to the existing literature by providing empirical evidence that supports the proposed hypothesis, thereby reinforcing the theoretical framework established in earlier sections of the paper.

Discussion

In this study, the authors developed a protocol for the extraction and characterization of microplastics (MPs) from bioconstruction and sediment samples collected from the Torre Mileto reef in the Mediterranean Sea. The protocol involved four main steps: drying samples at 40 °C, digesting with 30% hydrogen peroxide to remove organic matter, density separation using sodium iodide (NaI) solution, and vacuum filtration to extract MPs. The results indicated that the drying and digestion processes did not significantly alter the chemical structure of the MPs, as confirmed by Raman spectroscopy and scanning electron microscopy analyses. The extraction efficiency was notably higher with NaI (86.33 ± 8.20%) compared to sodium chloride (NaCl) (66.08 ± 8.76%), particularly for denser polymers like polyethylene terephthalate (PET).

Statistical analyses, including ANOVA and redundancy analysis, revealed that the type of salt used significantly influenced recovery efficiency, with NaI proving superior across various substrates and sample weights. The study also highlighted the limitations of NaCl for extracting denser polymers, which could lead to underestimations of MP abundance in environmental assessments. The findings underscore the importance of selecting appropriate density separation solutions and suggest that the proposed protocol is effective for accurately quantifying MPs in biogenic matrices, thereby contributing to better management of marine litter.