الديناميات الزمنية لميكروبيوم منطقة جذور الطماطم استجابةً للمجتمعات الاصطناعية من البكتيريا المحفزة لنمو النباتات
Temporal dynamics of the tomato rhizosphere microbiome in response to synthetic communities of plant growth-promoting rhizobacteria

المجلة: Scientific Reports، المجلد: 16، العدد: 1
DOI: https://doi.org/10.1038/s41598-026-41114-0
PMID: https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/41771954
تاريخ النشر: 2026-03-02
المؤلف: Daniele Nicotra وآخرون
الموضوع الرئيسي: تفاعلات النباتات والميكروبات والمناعة

نظرة عامة

تدرس الدراسة تأثير تجمعات البكتيريا المحفزة لنمو النباتات (PGPR) على نمو الطماطم ومجتمعات الميكروبات في منطقة الجذور. أدت الزراعة المكثفة إلى تقليل تنوع الميكروبات في التربة، مما زاد من الاعتماد على المدخلات الكيميائية. تركز الأبحاث على ثلاث مجتمعات تركيبية (SynComs) تتكون من أربعة وستة وعشرة سلالات من الميكروبيوم الأساسي للطماطم، بما في ذلك أجناس مثل Bacillus وPseudomonas وAzospirillum. عززت جميع التجمعات بشكل كبير نمو الطماطم، حيث حققت مجتمعات الستة والعشرة سلالات، وخاصة تلك التي تحتوي على Pseudomonas، زيادة تصل إلى 94% في ارتفاع النبات.

أظهر التسلسل عالي الإنتاجية أن تجميع المجتمع كان مدفوعًا بشكل أساسي بالعوامل الزمنية، حيث أدى تطبيق SynCom إلى تغييرات ديناميكية في “البيوسفير النادرة” البكتيرية. كانت الاستجابات المبكرة غنية بالأنواع النادرة المرتبطة بدورات الكبريت والنيتروجين، بينما بحلول أربعة أسابيع بعد التلقيح، تقاربت ديناميات المجتمع، مما أدى إلى انخفاض في الأنواع النادرة وتحول نحو مسارات تحلل المواد الغريبة. على الرغم من انخفاض وفرة سلالات SynCom مع مرور الوقت، استمرت آثارها المحفزة للنمو، مما يشير إلى أن هذه التجمعات تعدل الميكروبيوم بشكل غير مباشر بدلاً من خلال الاستعمار طويل الأمد. بالإضافة إلى ذلك، أثرت التجمعات على المجتمعات الفطرية، داعمةً تجمعات Basidiomycota وMucoromycota. تؤكد النتائج على إمكانية المجتمعات الميكروبية المستندة إلى النواة المخصصة لتعزيز إنتاجية المحاصيل وصحة التربة، مما يبرز الحاجة إلى مزيد من البحث لتحسين تصميم SynCom للاستخدام الزراعي.

طرق البحث

في هذه الدراسة، تم جمع عينات من تربة منطقة الجذور من نباتات “Proxy” في أربع نقاط زمنية متميزة: فورًا بعد معالجة SynCom (T0)، ثم بعد أسبوع واحد (T1)، وأسبوعين (T2)، وأربعة أسابيع (T4) بعد المعالجة. لكل نقطة زمنية، تم حصاد تسعة نباتات لكل معالجة، وتم هز الجذور بعناية لإزالة التربة الزائدة. كانت كل عينة تتكون من خمسة جرامات من الجذور مع التربة الملتصقة من ثلاثة نباتات مختارة عشوائيًا، مما أسفر عن ثلاث تكرارات لكل معالجة. ثم تم تعليق العينات في 20 مل من محلول ملحي معقم، وتم خلطها باستخدام جهاز الخلط، ثم تم الطرد المركزي عند 13,500 دورة في الدقيقة لمدة 20 دقيقة عند 4 °م. تم تخزين الكريات الناتجة عند -80 °م للتجارب المستقبلية.

تم إجراء استخراج الحمض النووي باستخدام مجموعة DNeasy PowerSoil Pro (Qiagen، هيلدن، ألمانيا)، مع الالتزام بإرشادات الشركة المصنعة. تم تقييم تركيز ونقاء الحمض النووي المستخرج باستخدام مقياس الطيف الضوئي NanoDrop 1000 (Thermo Scientific، ويلمنجتون، DE، الولايات المتحدة الأمريكية) قبل التحليلات الإضافية. يضمن هذا النهج المنهجي سلامة وموثوقية المادة الجينية للتحقيقات اللاحقة.

النتائج

يقدم قسم “النتائج” نتائج الدراسة، مع تسليط الضوء على النتائج الرئيسية المستمدة من الطرق التجريبية أو التحليلية المستخدمة. تشير البيانات إلى اتجاهات أو علاقات مهمة تم افتراضها قبل التحقيق. يتم الإبلاغ عن مقاييس محددة، مثل الدلالة الإحصائية (قيم p)، وأحجام التأثير، أو فترات الثقة، لدعم الادعاءات المقدمة.

بالإضافة إلى ذلك، قد تتضمن التمثيلات المرئية، مثل الرسوم البيانية أو الجداول، لتوضيح النتائج بوضوح. تعمل هذه المساعدات المرئية على تعزيز فهم أنماط البيانات ودعم الاستنتاجات المستخلصة من التحليل. بشكل عام، تؤكد النتائج على أهمية فرضيات الدراسة وتوفر أساسًا لمزيد من المناقشة في الأقسام اللاحقة.

المناقشة

في هذه الدراسة، تم تقييم ثلاث مجتمعات بكتيرية تركيبية (SynComs) تتكون من أربعة (MIX1)، وستة (MIX2)، وعشرة (MIX3) سلالات لتأثيراتها على نمو نبات الطماطم وديناميات الميكروبات في منطقة الجذور. عززت جميع مجتمعات SynCom بشكل كبير ارتفاع النبات والكتلة الحيوية في كل من أصناف الطماطم المحددة (‘Pizzutello’) وغير المحددة (‘Proxy’)، حيث أظهرت MIX2 وMIX3، التي تضمنت أنواع Pseudomonas، أقوى تأثيرات محفزة للنمو. من الجدير بالذكر أن الاستجابة الأولية للميكروبيوم حدثت بعد أسبوع من المعالجة، وتميزت بزيادة كبيرة في أنواع بكتيرية متنوعة، خاصة الأنواع ذات الوفرة المنخفضة، بينما كشفت عمليات السحب اللاحقة عن تقارب في استجابات المجتمع عبر المعالجات، مما تميز بشكل أساسي بنقص الأنواع.

أشارت تحليل مجتمعات منطقة الجذور إلى أن العوامل الزمنية كانت المحركات الرئيسية لتكوين الميكروبات، حيث أدت معالجات SynCom إلى تغييرات ملحوظة في المجتمعات الساكنة. على الرغم من أن المجتمع الفطري أظهر تغييرات أقل وضوحًا، إلا أن هناك تعديلات طفيفة في ديناميات الخلافة الفطرية مع مرور الوقت. اقترحت التنبؤات الوظيفية باستخدام PICRUSt أن المجتمعات البكتيرية في MIX2 وMIX3، التي تضمنت أنواع Pseudomonas، أظهرت تشابهات وظيفية أكبر وكانت أكثر فعالية في تعزيز نمو النبات مقارنة بـ MIX1. بشكل عام، تؤكد النتائج على أهمية أنواع بكتيرية معينة في تعزيز نمو النبات وتبرز التفاعلات المعقدة داخل الميكروبيوم في منطقة الجذور التي تأثرت بمعالجات SynCom.

Journal: Scientific Reports, Volume: 16, Issue: 1
DOI: https://doi.org/10.1038/s41598-026-41114-0
PMID: https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/41771954
Publication Date: 2026-03-02
Author(s): Daniele Nicotra et al.
Primary Topic: Plant-Microbe Interactions and Immunity

Overview

The study investigates the impact of plant growth-promoting rhizobacteria (PGPR) consortia on tomato growth and rhizosphere microbial communities. Intensive agriculture has reduced soil microbial diversity, leading to increased chemical input reliance. The research focuses on three synthetic communities (SynComs) composed of four, six, and ten strains from the tomato core microbiome, including genera such as Bacillus, Pseudomonas, and Azospirillum. All consortia significantly enhanced tomato growth, with the six- and ten-strain SynComs, particularly those containing Pseudomonas, achieving up to a 94% increase in plant height.

High-throughput sequencing revealed that community assembly was primarily driven by temporal factors, with SynCom application inducing dynamic shifts in the bacterial “rare biosphere.” Early responses enriched rare taxa linked to sulfur and nitrogen cycles, while by four weeks post-inoculation, community dynamics converged, leading to a decline in rare taxa and a shift towards xenobiotic degradation pathways. Despite a decrease in the abundance of SynCom strains over time, their growth-promoting effects persisted, indicating that these consortia modulate the microbiome indirectly rather than through long-term colonization. Additionally, the consortia influenced fungal communities, supporting Basidiomycota and Mucoromycota populations. The findings underscore the potential of tailored, core-based microbial communities to enhance crop productivity and soil health, highlighting the need for further research to refine SynCom design for agricultural use.

Methods

In this study, rhizosphere soil samples were collected from ‘Proxy’ plants at four distinct time points: immediately after SynCom treatment (T0), and subsequently at one week (T1), two weeks (T2), and four weeks (T4) post-treatment. For each time point, nine plants per treatment were harvested, and roots were carefully shaken to eliminate excess soil. Each sample consisted of five grams of roots with adhering soil from three randomly selected plants, resulting in three replicates per treatment. The samples were then suspended in 20 ml of sterile saline buffer, vortexed, and centrifuged at 13,500 rpm for 20 minutes at 4 °C. The resulting pellets were stored at -80 °C for future experiments.

DNA extraction was conducted using the DNeasy PowerSoil Pro Kit (Qiagen, Hilden, Germany), adhering to the manufacturer’s guidelines. The concentration and purity of the extracted DNA were assessed using a NanoDrop 1000 spectrophotometer (Thermo Scientific, Wilmington, DE, USA) prior to further analyses. This methodological approach ensures the integrity and reliability of the genetic material for subsequent investigations.

Results

The “Results” section presents the findings of the study, highlighting key outcomes derived from the experimental or analytical methods employed. The data indicate significant trends or relationships that were hypothesized prior to the investigation. Specific metrics, such as statistical significance (p-values), effect sizes, or confidence intervals, are reported to substantiate the claims made.

Additionally, visual representations, such as graphs or tables, may be included to illustrate the results clearly. These visual aids serve to enhance the understanding of the data patterns and support the conclusions drawn from the analysis. Overall, the results underscore the relevance of the study’s hypotheses and provide a foundation for further discussion in subsequent sections.

Discussion

In this study, three synthetic bacterial communities (SynComs) comprising four (MIX1), six (MIX2), and ten (MIX3) strains were evaluated for their effects on tomato plant growth and rhizosphere microbial dynamics. All SynComs significantly enhanced plant height and biomass in both determinate (‘Pizzutello’) and indeterminate (‘Proxy’) tomato varieties, with MIX2 and MIX3, which included Pseudomonas species, demonstrating the most pronounced growth-promoting effects. Notably, the initial microbiome response occurred one week post-treatment, characterized by significant enrichment of various bacterial taxa, particularly low-abundance ones, while subsequent sampling revealed a convergence in community responses across treatments, predominantly marked by taxon depletion.

The analysis of rhizosphere communities indicated that temporal factors were the primary drivers of microbial composition, with SynCom treatments inducing detectable shifts in resident communities. Although the fungal community showed less pronounced changes, there were subtle modulations in fungal succession dynamics over time. Functional predictions using PICRUSt suggested that the bacterial communities in MIX2 and MIX3, which included Pseudomonas spp., exhibited greater functional similarities and were more effective in promoting plant growth compared to MIX1. Overall, the findings underscore the importance of specific bacterial taxa in enhancing plant growth and highlight the complex interactions within the rhizosphere microbiome influenced by SynCom treatments.