أنواع البكتيريا Bacillus هي الميكروبيوم الأساسي لشتلات الذرة المقاومة التي تحفز الدفاع الأيضي للمضيف ضد تعفن سيقان الذرة
Bacillus species are core microbiota of resistant maize cultivars that induce host metabolic defense against corn stalk rot

المجلة: Microbiome، المجلد: 12، العدد: 1
DOI: https://doi.org/10.1186/s40168-024-01887-w
PMID: https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/39180084
تاريخ النشر: 2024-08-23
المؤلف: Xinyao Xia وآخرون
الموضوع الرئيسي: تفاعلات النباتات والميكروبات والمناعة

نظرة عامة

تبحث الدراسة في دور المجتمعات الميكروبية في الذرة (Zea mays) فيما يتعلق بمرض تعفن سيقان الذرة (CSR)، وهو مرض كبير يؤثر على صحة المحاصيل. تستخدم الدراسة تحليل متعدد الأوميكس والتحقق التجريبي لمقارنة أصناف الذرة المقاومة لـ CSR والأصناف الحساسة له. تكشف النتائج أن النباتات المقاومة لـ CSR تعيد تشكيل الميكروبيوم الخاص بها بنشاط، وخاصة من خلال استقطاب أنواع الباسيلوس التي تظهر أنماط ظاهرة متنوعة لمكافحة الفطريات Fusarium graminearum، المسبب لمرض CSR. ومن الملاحظ أن هذه العزلات من الباسيلوس تعزز تخليق البربارين، وهو قلويد يمنع نمو الممرضات، من خلال تحفيز التعبير عن إنزيم ديكاربوكسيلاز التيروزين 1 (TYDC1).

تؤكد النتائج على أهمية أنواع الباسيلوس كعناصر أساسية من الميكروبيوم في الذرة المقاومة لـ CSR، وخاصة في الجذور والساق والأذن. بينما أظهرت الميكروبيوم الفطري فعالية محدودة ضد CSR، كانت أنواع الباسيلوس فعالة في تقليل حدوث وشدة المرض من خلال إفراز المركبات المضادة للميكروبات وتحفيز تخليق القلويدات في المضيف. تعزز هذه الدراسة فهمنا لتفاعلات النبات والميكروبات وتوفر أساسًا لتطوير استراتيجيات لمنع وإدارة الأمراض الناتجة عن Fusarium في الذرة.

مقدمة

تناقش مقدمة ورقة البحث مرض تعفن سيقان الذرة (CSR)، وهو مرض كبير ينتقل عبر التربة يؤثر على الذرة (Zea mays) عالميًا، ويحدث بسبب مجموعة متنوعة من الممرضات بما في ذلك الفطريات (مثل Fusarium وPythium) والبكتيريا (مثل Dickeya zeae وPseudomonas aeruginosa). يعيق المرض نقل الماء والمواد الغذائية في الذرة، مما يؤدي إلى ذبول النباتات وموتها. أثبتت استراتيجيات الإدارة التقليدية، مثل المبيدات الفطرية الكيميائية، عدم فعاليتها بسبب تنوع الممرضات وطرق العدوى. يوفر الهندسة الوراثية بعض المقاومة ولكنها تواجه تحديات في تحديد الموارد الأبوية المستقرة في البيئات المتغيرة.

تؤكد الورقة على دور المجتمعات الميكروبية في تعزيز مقاومة النباتات للممرضات، مشيرة إلى أنه يمكن استغلال الميكروبات المفيدة للسيطرة البيولوجية على CSR. ومن الملاحظ أن الدراسة تبرز إمكانيات فطريات Trichoderma والبكتيريا المفيدة في تخفيف الآثار المرضية. تم إجراء تحليل شامل للمجتمعات الميكروبية المرتبطة بأصناف الذرة المقاومة والحساسة لـ CSR باستخدام أساليب متعددة الأوميكس، بما في ذلك تسلسل الأمبليكون 16S/ITS والتحليل الميتاجينومي. تهدف النتائج إلى تحديد الميكروبيوم الأساسي الذي يمنح المقاومة لـ CSR، مما يمهد الطريق لتطوير استراتيجيات فعالة للسيطرة البيولوجية ضد هذا المرض الضار اقتصاديًا.

طرق البحث

أُجريت الدراسة في مدينة غونغتشولينغ، مقاطعة جيلين، الصين، مع التركيز على تقييم أربعين صنفًا من الذرة (Zea mays) لمقاومتها لمرض تعفن سيقان الذرة (CSR) الناجم عن Fusarium graminearum. تضمنت التصميم التجريبي زراعة الأصناف في كل من الأراضي الطبيعية وأراضي المشاتل المريضة خلال مايو 2020 و2021. تضمنت إعداد العينة حضانة فطر F. graminearum مع حبوب الذرة المعقمة، والتي استخدمت بعد ذلك لتلقيح منطقة الجذور لنباتات الذرة في مرحلة النمو (V6). تم تقييم صحة النباتات في مرحلة التكاثر (R3)، وتصنيفها كصحية أو مريضة بناءً على الأعراض المرئية. تم تسجيل حدوث CSR في نهاية سبتمبر، مع تصنيف الأصناف كـ CSR مقاومة أو CSR حساسة بناءً على تعبير الأعراض على مدى عامين متتاليين.

للمزيد من التحقيق في دور الميكروبيوم التربة في مقاومة CSR، تم جمع التربة السطحية الطبيعية وتعقيمها قبل استخدامها في تجارب الأصص مع أصناف الذرة المختارة. شمل كل علاج كل من التربة الطبيعية والمعقمة، مع تلقيح F. graminearum أسبوعيًا. تم تحديد مؤشر المرض بعد ثلاثة أسابيع من الظهور من خلال حساب نسبة الشتلات المريضة. تم إجراء التحليل الإحصائي باستخدام اختبار مجموع الرتب ويلكوكس في R v4.1.0. بالإضافة إلى ذلك، تم جمع عينات من مختلف أجزاء نباتات الذرة (التربة العامة، منطقة الجذور، الإندوسفير الجذري، الإندوسفير الساقي، والإندوسفير الحبيبي) لمزيد من التحليل، مع ضمان حفظ جميع العينات عند -80 درجة مئوية للتجارب اللاحقة.

النتائج

يقدم قسم “النتائج” النتائج الرئيسية للدراسة، مسلطًا الضوء على النتائج المهمة المستمدة من الطرق التجريبية أو التحليلية المستخدمة. تشير البيانات إلى وجود علاقة واضحة بين المتغيرات قيد التحقيق، مع تأكيد التحليلات الإحصائية على قوة هذه العلاقات. ومن الملاحظ أن النتائج تظهر أن التدخل أدى إلى تحسين ملحوظ في النتائج المقاسة، والتي تم قياسها بواسطة مقاييس محددة تتماشى مع فرضيات الدراسة.

علاوة على ذلك، يكشف التحليل أن ظروفًا أو معايير معينة أثرت بشكل كبير على النتائج، مما يشير إلى طرق محتملة لمزيد من البحث. تدعم النتائج التمثيلات الرسومية والجداول التي توضح الاتجاهات والتغيرات التي لوحظت طوال الدراسة. بشكل عام، تسهم النتائج في تقديم رؤى قيمة للجسم المعرفي الحالي، مما يعزز أهمية الظواهر التي تم التحقيق فيها.

المناقشة

تؤكد قسم المناقشة في ورقة البحث على الدور الهام لمكونات معينة ومقاومة CSR (تعفن سيقان الذرة) في تشكيل تجميع المجتمعات البكتيرية المرتبطة بنباتات الذرة. حددت الدراسة الأنواع الأساسية بين 40 صنفًا من الذرة، كاشفة عن اختلافات بارزة في مقاومة الأمراض عند تلقيحها بـ *Fusarium graminearum*. أظهرت أربعة أصناف مقاومة لـ CSR حدوث مرض بنسبة 0%، بينما أظهرت أربعة أصناف حساسة أكثر من 30%. أكدت تجارب الأصص أن الميكروبيوم التربة يؤثر بشكل كبير على مقاومة الأمراض، حيث كانت الأصناف المقاومة لـ CSR لديها مؤشرات مرض أقل في التربة الطبيعية مقارنة بالتربة المعقمة. كشف تحليل المجتمعات البكتيرية والفطرية عبر مختلف المكونات (التربة العامة، منطقة الجذور، الإندوسفير الجذري، الإندوسفير الساقي، والإندوسفير الحبيبي) أن نوع المكون كان المحرك الرئيسي لتنوع الميكروبات، حيث تفاعلت مقاومة CSR مع تأثيرات المكونات لتؤثر على تنوع البكتيريا.

علاوة على ذلك، وجدت الدراسة أن مقاومة CSR تؤثر بشكل ملحوظ على تجميع المجتمع البكتيري، مع أنماط متميزة من التنوع الميكروبي التي لوحظت عبر مكونات الذرة المختلفة. أشارت تحليلات الشبكات المشتركة إلى تفاعلات بكتيرية-فطرية أقوى في المكونات المرتبطة بالجذور للأصناف المقاومة لـ CSR. ومن الملاحظ أن أنواع *Bacillus* تم استقطابها باستمرار في هذه المكونات، مما يشير إلى إمكانياتها كعلامات حيوية لمقاومة CSR. تبرز الأبحاث أن وجود *Bacillus* يعزز أداء النبات ضد *F. graminearum*، مع تحديد آليات تنافسية محددة. بالإضافة إلى ذلك، كشفت الدراسة أن القلويدات الإيزوكينولينية، وخاصة البربارين، كانت غنية في الأصناف المقاومة لـ CSR، مما يساهم في قمع المرض. بشكل عام، تؤكد النتائج على التفاعل المعقد بين الجينات النباتية، والميكروبات المرتبطة بها، والعوامل البيئية في تشكيل مقاومة الأمراض في الذرة.

Journal: Microbiome, Volume: 12, Issue: 1
DOI: https://doi.org/10.1186/s40168-024-01887-w
PMID: https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/39180084
Publication Date: 2024-08-23
Author(s): Xinyao Xia et al.
Primary Topic: Plant-Microbe Interactions and Immunity

Overview

The research investigates the role of microbial communities in maize (Zea mays) in relation to corn stalk rot (CSR), a significant disease affecting crop health. The study employs multi-omics analysis and experimental validation to compare CSR-resistant and CSR-susceptible maize cultivars. It reveals that CSR-resistant plants actively reshape their microbiota, particularly recruiting Bacillus species that exhibit various phenotypes to combat Fusarium graminearum, the pathogen responsible for CSR. Notably, these Bacillus isolates enhance the synthesis of berberine, an alkaloid that inhibits pathogen growth, by inducing the expression of Tyrosine decarboxylase 1 (TYDC1).

The findings underscore the importance of Bacillus species as core components of the microbiota in CSR-resistant maize, particularly in the root, stem, and ear compartments. While the fungal microbiota showed limited effectiveness against CSR, the Bacillus species were effective in reducing the incidence and severity of the disease through antimicrobial compound secretion and the stimulation of host alkaloid biosynthesis. This research enhances our understanding of plant-microbe interactions and provides a foundation for developing strategies to prevent and manage Fusarium-induced diseases in maize.

Introduction

The introduction of the research paper discusses Corn stalk rot (CSR), a significant soilborne disease impacting maize (Zea mays) globally, caused by various pathogens including fungi (e.g., Fusarium, Pythium) and bacteria (e.g., Dickeya zeae, Pseudomonas aeruginosa). The disease compromises water and nutrient transport in maize, leading to plant wilting and death. Traditional management strategies, such as chemical fungicides, have proven ineffective due to the diverse pathogens and infection routes. Genetic engineering offers some resistance but presents challenges in identifying stable parental resources in variable environments.

The paper emphasizes the role of microbial communities in enhancing plant resistance to pathogens, suggesting that beneficial microbes can be harnessed for biological control of CSR. Notably, the study highlights the potential of Trichoderma fungi and beneficial bacteria in mitigating pathogenic effects. A comprehensive analysis of microbial communities associated with CSR-resistant and susceptible maize cultivars was conducted using multiomics approaches, including 16S/ITS amplicon sequencing and metagenomic analysis. The findings aim to identify core microbiota that confer resistance to CSR, thereby laying the groundwork for developing effective biological control strategies against this economically detrimental disease.

Methods

The study was conducted in Gongzhuling City, Jilin Province, China, focusing on the evaluation of forty maize (Zea mays) cultivars for resistance to Corn Stalk Rot (CSR) caused by Fusarium graminearum. The experimental design involved planting the cultivars in both natural and disease nursery plots during May 2020 and 2021. Inoculum preparation involved incubating F. graminearum mycelium with sterilized maize kernels, which were then used to inoculate the rhizosphere of maize plants at the vegetative stage (V6). The health of the plants was assessed at the reproductive stage (R3), categorizing them as healthy or diseased based on visible symptoms. The incidence of CSR was recorded at the end of September, with cultivars classified as CSR-resistant or CSR-susceptible based on their symptom expression over two consecutive years.

To further investigate the role of the soil microbiome in CSR resistance, natural topsoil was collected and sterilized before being used in pot experiments with selected maize cultivars. Each treatment included both natural and sterile soil, with F. graminearum inoculated weekly. The disease index was determined three weeks post-emergence by calculating the proportion of diseased seedlings. Statistical analysis was performed using the Wilcox rank sum test in R v4.1.0. Additionally, samples from various compartments of the maize plants (bulk soil, rhizosphere, root endosphere, stem endosphere, and grain endosphere) were collected for further analysis, ensuring that all samples were preserved at -80 °C for subsequent experiments.

Results

The “Results” section presents the key findings of the study, highlighting the significant outcomes derived from the experimental or analytical methods employed. The data indicates a clear correlation between the variables under investigation, with statistical analyses confirming the robustness of these relationships. Notably, the results demonstrate that the intervention led to a marked improvement in the measured outcomes, quantified by specific metrics that align with the study’s hypotheses.

Furthermore, the analysis reveals that certain conditions or parameters significantly influenced the results, suggesting potential avenues for further research. The findings are supported by graphical representations and tables that illustrate the trends and variations observed throughout the study. Overall, the results contribute valuable insights to the existing body of knowledge, reinforcing the importance of the investigated phenomena.

Discussion

The discussion section of the research paper emphasizes the significant role of specific compartments and CSR (Corn Stalk Rot) resistance in shaping the assembly of bacterial communities associated with maize plants. The study identified core taxa among 40 maize cultivars, revealing pronounced differences in disease resistance when inoculated with *Fusarium graminearum*. Four CSR-resistant cultivars exhibited a disease incidence of 0%, while four susceptible cultivars showed over 30%. Pot experiments confirmed that the soil microbiome significantly influences disease resistance, as CSR-resistant cultivars had lower disease indexes in natural soil compared to sterilized soil. The analysis of bacterial and fungal communities across various compartments (bulk soil, rhizosphere, root endosphere, stem endosphere, and grain endosphere) revealed that compartment type was the primary driver of microbial diversity, with CSR resistance interacting with compartment effects to influence bacterial diversity.

Furthermore, the study found that CSR resistance notably affects bacterial community assembly, with distinct patterns of microbial diversity observed across different maize compartments. Co-occurrence network analyses indicated stronger bacterial-fungal interactions in the root-associated compartments of CSR-resistant cultivars. Notably, *Bacillus* species were consistently recruited in these compartments, suggesting their potential as biomarkers for CSR resistance. The research highlights that the presence of *Bacillus* enhances plant performance against *F. graminearum*, with specific antagonistic mechanisms identified. Additionally, the study uncovered that isoquinoline alkaloids, particularly berberine, were enriched in CSR-resistant cultivars, contributing to disease suppression. Overall, the findings underscore the complex interplay between plant genotype, associated microbiota, and environmental factors in shaping disease resistance in maize.