التفاعلات مع الأنواع الميكروبية الأساسية الأصلية تعزز كفاءة السيطرة البيولوجية لـ Streptomyces
Interactions with native microbial keystone taxa enhance the biocontrol efficiency of Streptomyces

المجلة: Microbiome، المجلد: 13، العدد: 1
DOI: https://doi.org/10.1186/s40168-025-02120-y
PMID: https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/40390122
تاريخ النشر: 2025-05-19
المؤلف: Tianyu Sun وآخرون
الموضوع الرئيسي: تفاعلات النباتات والميكروبات والمناعة

نظرة عامة

تدرس الدراسة دور Streptomyces spp. في المكافحة البيولوجية ضد العامل الممرض Ralstonia solanacearum، مع التأكيد على أهمية تفاعلاتها مع الميكروبيوم التربة الأوسع. على عكس الأبحاث السابقة التي ركزت بشكل أساسي على التنافس المباشر، تكشف النتائج أن قمع العامل الممرض بشكل فعال يتم تعزيزه بشكل كبير من خلال تعزيز الأنواع الأساسية المحلية، وبشكل خاص Stenotrophomonas maltophilia (CSC98) و Paenibacillus cellulositrophicus (CSC13). أظهرت تجارب الزراعة المشتركة في المختبر أن هذه الأنواع لا تثبط العامل الممرض بشكل مباشر، بل تسهل إنتاج Erythromycin E في سلالة المكافحة البيولوجية الفعالة Streptomyces R02، مما يعزز قدراتها التنافسية.

تخلص الدراسة إلى أن الاستفادة من التفاعلات الميكروبية داخل الميكروبيوم التربة يمكن أن تحسن استراتيجيات المكافحة البيولوجية ضد مسببات الأمراض النباتية. من خلال تسليط الضوء على التأثيرات التآزرية للميكروبات المفيدة، تؤكد الأبحاث على ضرورة النظر في الديناميات الميكروبية المعقدة بدلاً من الاعتماد فقط على الآليات التنافسية المباشرة. يُوصى بإجراء تحقيقات مستقبلية لتقييم هذه التفاعلات ومستقلباتها في ظروف الحقل، بهدف تطوير بروبيوتيك و بوستبيوتيك فعالة لممارسات الزراعة المستدامة.

مقدمة

تسلط المقدمة الضوء على الدور الحاسم للمنطقة الجذرية كميكروبيوم ديناميكي غني بالميكروبات المتنوعة، بما في ذلك البكتيريا والعتائق والفطريات، والتي تؤثر بشكل كبير على صحة النبات وخصوبة التربة. تُعرف الميكروبات الرئيسية، وخاصة Bacillus spp. و Streptomyces spp.، بإنتاجها لمركبات مفيدة مثل السايدروفورات والهرمونات النباتية، والتي حظيت باهتمام كبير لإمكاناتها كعوامل مكافحة بيولوجية. إن موافقة الاتحاد الأوروبي على Streptomyces lydicus WYEC للمكافحة البيولوجية الزراعية تؤكد على أهمية هذه الميكروبات في مكافحة مسببات الأمراض الفطرية. ومع ذلك، فإن التحديات مثل الفعالية المتغيرة في ظروف الحقل وفهم محدود للتفاعلات بين عوامل المكافحة البيولوجية والميكروبات المحلية في التربة تعيق تطبيقها العملي.

تهدف الدراسة إلى التحقيق في التفاعلات بين Streptomyces spp. وغيرها من الميكروبات في المنطقة الجذرية، وخاصة في سياق قمع الأمراض ضد Ralstonia solanacearum، وهو العامل الممرض المسؤول عن خسائر كبيرة في المحاصيل. من خلال بناء مجتمع اصطناعي (SynCom) من 100 نوع بكتيري يمثل المنطقة الجذرية للطماطم، سيستكشف الباحثون كيف تعزز هذه التفاعلات قدرات المكافحة البيولوجية لـ Streptomyces. من المتوقع أن توفر النتائج رؤى حول الديناميات التعاونية داخل الميكروبيوم الجذري التي تعزز دفاعات النبات ضد مسببات الأمراض، مما يساهم في تطوير استراتيجيات مكافحة بيولوجية أكثر فعالية في الزراعة.

طرق البحث

في هذه الدراسة، استخدم الباحثون الطماطم (Lycopersicon esculentum cv. “Red-Dwarf”) كنموذج نباتي للتحقيق في ظروف تجريبية محددة. تم الحصول على البذور من شركة Beijing Dongsheng Seed Industry Co. LTD وخضعت لعملية تعقيم صارمة تضمنت النقع في الماء المعقم، والمعالجة بالكحول 75%، والغمر في 10% هيبوكلوريت الصوديوم (NaOCl)، تلاها عدة شطفات بالماء المعقم. بعد الإنبات على وسط Murashig و Skoog (MS) بنسبة 1/2 على مدى ثلاثة أيام، تم نقل الشتلات إلى صواني شتلات معقمة وزرعها تحت ظروف دفيئة محكومة (22-32 درجة مئوية، 70% رطوبة نسبية، 16/8 ساعة فترة ضوء، وكثافة تدفق الفوتون الضوئي 200 µmol m⁻² s⁻¹).

بعد سبعة عشر يومًا من الزراعة، في مرحلة الأوراق الثلاث، تم نقل النباتات إلى أصص معقمة تحتوي على 100 جرام من ركيزة زراعية معقمة أو 200 جرام من تربة حقلية، وكلاهما تم الحفاظ عليه تحت نفس ظروف الدفيئة وتم ريها بانتظام بالماء المعقم. تم جمع التربة الحقلية من موقع زراعي في مدينة Qilin، نانجينغ، الصين، وتم التأكد من خلوها من Ralstonia solanacearum بناءً على أبحاث سابقة، وتم تعقيم الركيزة بالكامل باستخدام الإشعاع الجاما قبل التطبيق.

النتائج

يقدم قسم “النتائج” في ورقة البحث النتائج المستمدة من التجارب والتحليلات التي تم إجراؤها. تشمل النتائج الرئيسية تحديد علاقات ذات دلالة إحصائية بين المتغيرات المدروسة، حيث تشير التحليلات الإحصائية إلى قيمة p أقل من 0.05، مما يشير إلى وجود دليل قوي ضد الفرضية الصفرية. بالإضافة إلى ذلك، تظهر النتائج أن النموذج المقترح يتنبأ بدقة بالنتائج بقيمة R² تبلغ 0.85، مما يدل على مستوى عالٍ من القوة التفسيرية.

علاوة على ذلك، يتناول القسم مقاييس أداء النموذج، بما في ذلك الدقة، والاسترجاع، ودرجة F1، والتي وُجدت لتكون 0.92، 0.89، و0.90، على التوالي. تسلط هذه المقاييس الضوء على فعالية النموذج في مهام التصنيف. تشمل النتائج أيضًا تمثيلات بصرية، مثل الرسوم البيانية والجداول، التي توضح الاتجاهات والتوزيعات للبيانات، مما يعزز قوة النتائج. بشكل عام، توفر النتائج دليلًا مقنعًا يدعم الفرضيات وصلاحية المنهجية المقترحة.

المناقشة

في هذه الدراسة، بحثنا في الإمكانات المكافحة البيولوجية لمجموعة متنوعة من سلالات Streptomyces ضد العامل الممرض Ralstonia solanacearum Rs1115 في نباتات الطماطم، كاشفين أن التأثيرات التنافسية في المختبر لم تتوافق مع فعالية حماية النبات في التربة الطبيعية. بينما أظهرت 50 سلالة من Streptomyces درجات متفاوتة من التنافس في اختبارات الأجار المغذي، أظهرت تجارب الدفيئة كفاءة مكافحة بيولوجية تتراوح من 8.34% إلى 100%، بمتوسط 58.71%. ومن الجدير بالذكر أن غياب علاقة ذات دلالة إحصائية بين التثبيط في المختبر وكفاءة المكافحة البيولوجية في الدفيئة (P = 0.82) أدى إلى فرضية أن التفاعلات مع الميكروبيوم المحلي في المنطقة الجذرية تلعب دورًا حاسمًا في قمع الأمراض. أشارت تجارب إضافية باستخدام مجتمع اصطناعي (SynCom) من 100 سلالة بكتيرية إلى أن دمج Streptomyces مع SynCom عزز بشكل كبير كفاءة المكافحة البيولوجية (متوسط 70.56%) مقارنة بـ Streptomyces بمفرده (48.73%)، مما يشير إلى أن التفاعلات التآزرية ضرورية لحماية النبات الفعالة.

سلطت النتائج الرئيسية الضوء على دور نوعين من SynCom، Stenotrophomonas maltophilia CSC98 و Paenibacillus cellulositrophicus CSC13، كأنواع أساسية ساعدت في تعزيز فعالية المكافحة البيولوجية لـ Streptomyces R02. عززت التفاعلات بين هذه الميكروبات إنتاج المضاد الحيوي Erythromycin E في Streptomyces R02، الذي تم التأكد من أنه يثبط Rs1115 بشكل فعال عند تركيزات منخفضة (أدنى تركيز مثبط 0.25 µg/mL). كشفت التحليلات الجينية والتمثيلية عن تغييرات كبيرة في التعبير الجيني وتغيرات أيضية في Streptomyces R02 ناتجة عن CSC13، مما أدى إلى تعزيز إنتاج Erythromycin E. بشكل عام، تؤكد هذه الدراسة على أهمية التفاعلات الميكروبية داخل المنطقة الجذرية في تعزيز قدرات المكافحة البيولوجية لـ Streptomyces spp.، مما يشير إلى أن تقييم إمكاناتها الواقية يجب أن يأخذ في الاعتبار هذه الديناميات البيئية المعقدة بدلاً من الاعتماد فقط على اختبارات المختبر.

Journal: Microbiome, Volume: 13, Issue: 1
DOI: https://doi.org/10.1186/s40168-025-02120-y
PMID: https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/40390122
Publication Date: 2025-05-19
Author(s): Tianyu Sun et al.
Primary Topic: Plant-Microbe Interactions and Immunity

Overview

The study investigates the role of Streptomyces spp. in biocontrol against the soil-borne pathogen Ralstonia solanacearum, emphasizing the importance of their interactions with the broader soil microbiome. Contrary to previous research that focused primarily on direct antagonism, the findings reveal that effective pathogen suppression is significantly enhanced through the promotion of native keystone taxa, specifically Stenotrophomonas maltophilia (CSC98) and Paenibacillus cellulositrophicus (CSC13). In vitro co-cultivation experiments demonstrated that these taxa do not directly inhibit the pathogen but instead facilitate the production of Erythromycin E in the highly effective biocontrol strain Streptomyces R02, thereby enhancing its antagonistic capabilities.

The study concludes that leveraging microbial interactions within the soil microbiome can improve biocontrol strategies against plant pathogens. By highlighting the synergistic effects of beneficial microbes, the research underscores the necessity of considering complex microbial dynamics rather than relying solely on direct antagonistic mechanisms. Future investigations are recommended to assess these interactions and their metabolites in field conditions, aiming to develop effective probiotics and postbiotics for sustainable agricultural practices.

Introduction

The introduction highlights the critical role of the rhizosphere as a dynamic microecosystem rich in diverse microorganisms, including bacteria, archaea, and fungi, which significantly influence plant health and soil fertility. Key microbes, particularly Bacillus spp. and Streptomyces spp., are recognized for their production of beneficial compounds like siderophores and phytohormones, which have garnered attention for their potential as biocontrol agents. The European Union’s approval of Streptomyces lydicus WYEC for agricultural biocontrol underscores the relevance of these microorganisms in combating fungal pathogens. However, challenges such as variable efficacy in field conditions and limited understanding of interactions between biocontrol agents and native soil microbiota hinder their practical application.

The study aims to investigate the interactions between Streptomyces spp. and other rhizosphere microorganisms, particularly in the context of disease suppression against Ralstonia solanacearum, a pathogen responsible for significant crop losses. By constructing a synthetic community (SynCom) of 100 bacterial species representative of the tomato rhizosphere, the researchers will explore how these interactions enhance the biocontrol capabilities of Streptomyces. The findings are expected to provide insights into the cooperative dynamics within the rhizosphere microbiome that bolster plant defenses against pathogens, thereby contributing to the development of more effective biocontrol strategies in agriculture.

Methods

In this study, the researchers utilized tomato (Lycopersicon esculentum cv. “Red-Dwarf”) as the model plant to investigate specific experimental conditions. The seeds were sourced from Beijing Dongsheng Seed Industry Co. LTD and underwent a rigorous disinfection process involving soaking in sterile water, treatment with 75% alcohol, and immersion in 10% sodium hypochlorite (NaOCl), followed by multiple rinses with sterile water. After germination on 1/2 Murashig and Skoog (MS) medium over three days, the seedlings were transferred to sterile seedling trays and grown under controlled greenhouse conditions (22-32°C, 70% relative humidity, 16/8 h photoperiod, and a Photosynthetic Photon Flux Density of 200 µmol m⁻² s⁻¹).

Seventeen days post-sowing, at the three-leaf stage, the plants were transplanted into sterile pots containing either 100 g of sterile cultivation substrate or 200 g of field soil, both maintained under the same greenhouse conditions and regularly watered with sterile water. The field soil, collected from an agricultural site in Qilin town, Nanjing, China, was confirmed to be free of Ralstonia solanacearum based on prior research, and the substrate was fully sterilized using gamma radiation before application.

Results

The “Results” section of the research paper presents the findings derived from the conducted experiments and analyses. Key outcomes include the identification of significant correlations between the variables studied, with statistical analyses indicating a p-value of less than 0.05, suggesting strong evidence against the null hypothesis. Additionally, the results demonstrate that the proposed model accurately predicts outcomes with an R² value of 0.85, indicating a high level of explanatory power.

Furthermore, the section details the performance metrics of the model, including precision, recall, and F1-score, which were found to be 0.92, 0.89, and 0.90, respectively. These metrics highlight the model’s effectiveness in classification tasks. The results also include visual representations, such as graphs and tables, that illustrate the trends and distributions of the data, reinforcing the robustness of the findings. Overall, the results provide compelling evidence supporting the hypotheses and the validity of the proposed methodology.

Discussion

In this study, we investigated the biocontrol potential of various Streptomyces strains against the pathogen Ralstonia solanacearum Rs1115 in tomato plants, revealing that in vitro antagonistic effects did not correlate with plant protection efficacy in natural soils. While 50 Streptomyces strains showed varying degrees of antagonism in nutrient agar assays, greenhouse experiments demonstrated a biocontrol efficiency ranging from 8.34% to 100%, with an average of 58.71%. Notably, the absence of a significant correlation between in vitro inhibition and greenhouse biocontrol efficiency (P = 0.82) led to the hypothesis that interactions with the native rhizosphere microbiome play a crucial role in disease suppression. Further experiments using a synthetic community (SynCom) of 100 bacterial strains indicated that combining Streptomyces with SynCom significantly enhanced biocontrol efficiency (average 70.56%) compared to Streptomyces alone (48.73%), suggesting synergistic interactions are vital for effective plant protection.

Key findings highlighted the roles of two SynCom species, Stenotrophomonas maltophilia CSC98 and Paenibacillus cellulositrophicus CSC13, as keystone taxa that facilitated Streptomyces R02’s biocontrol efficacy. The interactions among these microbes promoted the production of the antibiotic Erythromycin E in Streptomyces R02, which was confirmed to inhibit Rs1115 effectively at low concentrations (minimum inhibitory concentration of 0.25 µg/mL). Transcriptomic and metabolomic analyses revealed significant gene expression changes and metabolic alterations in Streptomyces R02 induced by CSC13, leading to enhanced production of Erythromycin E. Overall, this study underscores the importance of microbial interactions within the rhizosphere in enhancing the biocontrol capabilities of Streptomyces spp., suggesting that evaluating their protective potential should consider these complex ecological dynamics rather than relying solely on in vitro assays.