DOI: https://doi.org/10.1038/s41598-024-54602-y
PMID: https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/38366006
تاريخ النشر: 2024-02-16
المؤلف: Fatemeh Bakhshipour وآخرون
الموضوع الرئيسي: عدوى الديدان الطفيلية والسيطرة عليها
نظرة عامة
داء الفاسيولا، الذي تسببه أنواع الفاسيولا، هو عدوى طفيلي zoonotic هامة تؤثر على كل من البشر والحيوانات، ومع ذلك تظل طرق التشخيص لحالات البشر غير مستكشفة بشكل كافٍ على الرغم من التقدم في العلاج والتطعيم. هدف هذه الدراسة إلى تقييم فعالية PCR في الوقت الحقيقي مقابل ELISA غير المباشر للكشف عن فاسيولا هيباتيكا في المرضى البشر. باستخدام مجموعة من عينات المصل من 70 فردًا، بما في ذلك المصابين بـ F. hepatica (n = 51)، وعدوى طفيلي أخرى (n = 7)، وشهادات غير مصابة (n = 12)، قام الباحثون بتحسين ELISA باستخدام مستضدات الإفرازات من F. hepatica. أظهرت النتائج أن كلا الاختبارين حدد 44 (62.86%) عينة على أنها إيجابية لـ F. hepatica، مع معدل اتفاق مرتفع قدره 94.4% لـ ELISA و99.2% لـ PCR في الوقت الحقيقي، مما يدل على موثوقيتها في تشخيص هذه العدوى.
تسلط النتائج الضوء على أنه بينما يمكن أن تشير الطرق المصلية إلى التعرض لـ F. hepatica، إلا أنها قد لا تعكس بدقة العدوى الحالية بسبب استمرار الأجسام المضادة بعد العلاج. تؤكد الدراسة على إمكانية PCR في الوقت الحقيقي كأداة تشخيصية حساسة يمكن أن تعزز مراقبة وبائية F. hepatica وتوجه استراتيجيات الصحة العامة. نظرًا للتحدي العالمي في السيطرة على داء الفاسيولا، تدعو الأبحاث إلى تقييم نوعي وكمّي للاختبارات التشخيصية الحالية وتطوير اختبارات ميدانية محسّنة لإدارة أفضل لهذه المرض الاستوائي المهمل.
الطرق
يستعرض قسم “المواد والطرق” التصميم التجريبي والإجراءات المستخدمة في الدراسة. يوضح المواد المحددة المستخدمة، بما في ذلك أي مواد كيميائية، وأدوات، وعينات بيولوجية، مما يضمن إمكانية تكرار التجارب. تشمل المنهجية التقنيات المطبقة لجمع البيانات وتحليلها، مثل الطرق الإحصائية، والبروتوكولات التجريبية، وأي ضوابط تم تنفيذها للتحقق من النتائج.
بالإضافة إلى ذلك، قد يصف القسم طرق أخذ العينات، ومعايير اختيار المشاركين، وأي اعتبارات أخلاقية تم الالتزام بها خلال البحث. من خلال تقديم نظرة شاملة على المواد والطرق، يؤسس هذا القسم الأساس لنتائج الدراسة ويسمح بالتقييم النقدي من قبل الأقران في المجال.
المناقشة
في هذه الدراسة، تم تقييم فعالية التشخيص للطرق المصلية والجزيئية للكشف عن عدوى *فاسيولا هيباتيكا* في البشر. تم الحصول على الموافقة الأخلاقية، وتم تحليل 70 عينة مصل، منها 51 من مرضى تم تشخيصهم بداء الفاسيولا الكبدية. استخدمت الدراسة اختبار الامتصاص المناعي المرتبط بالإنزيم (ELISA) وتقنيات تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR)، وكشفت أن 62.86% من العينات كانت إيجابية لداء الفاسيولا باستخدام ELISA، بينما أكد PCR 44 حالة إيجابية. وُجد توافق كبير (99.2%) بين نتائج ELISA وPCR في الوقت الحقيقي، مع معامل كابا لكوهين قدره 0.71، مما يدل على وجود ارتباط قوي بين طريقتي التشخيص.
تسلط النتائج الضوء على قيود الاختبارات المصلية، التي قد تعطي نتائج إيجابية خاطئة بسبب التفاعل المتبادل ويمكن أن تبقى إيجابية لفترة طويلة بعد العلاج. في المقابل، أظهرت الطرق الجزيئية مثل PCR في الوقت الحقيقي حساسية وخصوصية أعلى، مما يعالج بشكل فعال مشكلة النتائج السلبية الخاطئة المرتبطة بالاختبارات المصلية. تؤكد الدراسة على أهمية دمج التقنيات الجزيئية في بروتوكولات التشخيص لداء الفاسيولا، حيث يمكن أن تعزز دقة التشخيص وتساهم في إدارة أفضل للمرض. بشكل عام، تدعو الأبحاث إلى التقييم المستمر وتحسين الاختبارات التشخيصية لمكافحة التحدي العالمي الذي يطرحه داء الفاسيولا.
DOI: https://doi.org/10.1038/s41598-024-54602-y
PMID: https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/38366006
Publication Date: 2024-02-16
Author(s): Fatemeh Bakhshipour et al.
Primary Topic: Helminth infection and control
Overview
Fascioliasis, caused by Fasciola species, is a significant zoonotic parasitic infection affecting both humans and animals, yet diagnostic methods for human cases remain underexplored despite advancements in treatment and vaccination. This study aimed to evaluate the efficacy of Real-Time PCR against indirect ELISA for detecting Fasciola hepatica in human patients. Utilizing a sample set of sera from 70 individuals, including those infected with F. hepatica (n = 51), other parasitic infections (n = 7), and uninfected controls (n = 12), the researchers optimized an ELISA using excretory-secretory antigens from F. hepatica. The results indicated that both assays identified 44 (62.86%) samples as positive for F. hepatica, with a high agreement rate of 94.4% for ELISA and 99.2% for Real-Time PCR, demonstrating their reliability in diagnosing this infection.
The findings highlight that while serological methods can indicate exposure to F. hepatica, they may not accurately reflect current infections due to the persistence of antibodies post-treatment. The study underscores the potential of Real-Time PCR as a sensitive diagnostic tool that can enhance monitoring of F. hepatica’s epidemiology and inform public health strategies. Given the global challenge of controlling fascioliasis, the research advocates for a qualitative and quantitative assessment of existing diagnostic tests and the development of improved field tests to better manage this neglected tropical disease.
Methods
The “Materials and Methods” section outlines the experimental design and procedures employed in the study. It details the specific materials used, including any reagents, instruments, and biological samples, ensuring reproducibility of the experiments. The methodology encompasses the techniques applied for data collection and analysis, such as statistical methods, experimental protocols, and any controls implemented to validate the results.
Additionally, the section may describe the sampling methods, participant selection criteria, and any ethical considerations adhered to during the research. By providing a comprehensive overview of the materials and methods, this section establishes the foundation for the study’s findings and allows for critical evaluation by peers in the field.
Discussion
In this study, the diagnostic efficacy of serological and molecular methods for detecting *Fasciola hepatica* infection in humans was evaluated. Ethical approval was obtained, and 70 serum samples were analyzed, with 51 from patients diagnosed with hepatobiliary fascioliasis. The study employed enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) and polymerase chain reaction (PCR) techniques, revealing that 62.86% of samples tested positive for fascioliasis using ELISA, while PCR confirmed 44 positive cases. A significant agreement (99.2%) was found between the results of ELISA and Real-Time PCR, with a Cohen’s kappa coefficient of 0.71, indicating a strong correlation between the two diagnostic methods.
The findings highlight the limitations of serological tests, which may yield false positives due to cross-reactivity and can remain positive long after treatment. In contrast, molecular methods like Real-Time PCR demonstrated higher sensitivity and specificity, effectively addressing the issue of false negatives associated with serological testing. The study underscores the importance of integrating molecular techniques into diagnostic protocols for fascioliasis, as they can enhance the accuracy of diagnosis and contribute to better management of the disease. Overall, the research advocates for the continued evaluation and improvement of diagnostic tests to combat the global challenge posed by fascioliasis.